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Sobre el conteo de células

Vistas:0     Autor:Editor del sitio     Hora de publicación: 2022-12-19      Origen:Sitio

La citometría es cualquiera de los diversos métodos utilizados en las ciencias de la vida para el recuento de células o cuantificación similar, incluida médico Diagnóstico y tratamiento. Es un subconjunto importante de citometría y tiene aplicaciones tanto en investigación como en práctica clínica. Por ejemplo, un recuento sanguíneo completo puede ayudar a los médicos a determinar por qué una persona se siente mal y cómo ayudar. Los lavados de sangre, plasma, linfa o laboratorio generalmente se expresan como el número de células por unidad de volumen, expresando así una concentración (por ejemplo, 5,000 células por mililitro).

Usos Conteo de células

Muchos procedimientos biológicos y médicos requieren contar células. Las concentraciones se pueden ajustar contando un pequeño volumen conocido de células. Los ejemplos donde se requieren recuentos de células incluyen:En medicina, la concentración de varias células sanguíneas, como los glóbulos rojos y blancos, puede proporcionar información importante sobre la salud de una persona.En la terapia celular, se controla la dosis de células administrada al paciente.Del mismo modo, la concentración de bacterias, virus y otros patógenos en la sangre u otros fluidos corporales puede revelar información sobre la progresión de una enfermedad infecciosa y cuán exitoso responde el sistema inmune a la infección.Muchos experimentos de biología molecular requieren conocimiento de las concentraciones celulares para ajustar las cantidades de reactivos y productos químicos utilizados en el experimento en consecuencia.Los estudios que examinan la tasa de crecimiento de los microorganismos (en otras palabras, la rapidez con que se dividen para producir nuevas células) requieren recuentos celulares.Calcule la relación de células muertas con células vivas como una medida de la viabilidad celular, por ejemplo, células expuestas a sustancias tóxicas.

Conteo de células manuales:

Existen varios métodos para el recuento de células. Algunos son primitivos y no requieren equipos especiales, por lo que se puede hacer en ningún laboratorio biológico, mientras que otros confían en la electrónica sofisticada.

Contador:

Las cámaras de conteo son diapositivas de microscopio diseñadas para el conteo de células. Los citómetros y las cámaras de conteo de rafter de espesas son dos tipos de cámaras de conteo. Hay dos cámaras pequeñas en forma de cuadrícula en el medio del contador de glóbulos sanguíne . Una gota de cultivo celular se coloca en el espacio entre la cámara y el cubreobjetos, llenándola por acción capilar. La distancia de separación entre la cámara y la tapa está predefinida para que el volumen del cultivo contado pueda calcularse y usarse para calcular la concentración celular. La viabilidad de las células también se puede determinar si se agrega un colorante reactivo al fluido.Tienen la ventaja de ser económicos y rápidos; Esto los convierte en el método de conteo preferido para experimentos biológicos rápidos donde solo es necesario determinar si un cultivo celular está creciendo como se esperaba. Típicamente los cultivos examinados deben diluirse, de lo contrario la alta densidad de las células no será contable. La necesidad de La dilución es una desventaja ya que cada dilución aumenta la inexactitud de la medición.

Enchapado y conteo de CFU:

Para cuantificar el número de células en el cultivo, las células se pueden placas simplemente en placas de Petri que contienen medio de crecimiento. Si las células se distribuyen de manera eficiente en la placa, generalmente se puede suponer que cada célula producirá una sola colonia o unidades de formación de colonias (CFU (CFU ). Las colonias se pueden contar y basarse en el volumen de cultivo conocido distribuido en la placa, la concentración celular se puede calcular. Esto generalmente se realiza de acuerdo con ASTM D5465.Al igual que con las cámaras de contar, las culturas a menudo requieren una dilución sustancial antes de la inoculación; De lo contrario, la llamada forma de "césped" en lugar de contar colonias individuales: miles de colonias se superponen entre sí. Furtones, el enchapado es el más lento de todos los métodos: la mayoría de los microorganismos requieren al menos 12 horas para formar colonias visibles.Si bien este método puede llevar mucho tiempo, permite una estimación precisa del número de células viables (ya que solo ellos pueden crecer y formar colonias visibles). Por lo tanto, se usa ampliamente en experimentos destinados a cuantificar el número de células resistentes a Drogas u otras condiciones externas (por ejemplo, ensayo de Luria-Delbrück o ensayo de protección de gentamicina). Además, el uso de un mostrador de colonia puede facilitar en gran medida los recuentos de colonias en placas de agar.